In breve, le reazioni linfocitarie miste (MLR) sono saggi di proliferazione cellulare. Esistono alcuni tipi principali di MLR (unidirezionale, bidirezionale e a tre vie) e molti modi diversi per configurarli in modo che soddisfino le linee guida di uno scienziato o di un’organizzazione, nonché le linee guida normative che devono seguire. Nel tentativo di mantenere questa guida semplice, discuteremo solo i due tipi principali di MLR.
MLR unidirezionali-
I MLR unidirezionali sono un test di proliferazione cellulare in cui una popolazione di linfociti (cellule responder) viene stimolata a proliferare da un’altra popolazione di linfociti (cellule stimolatrici) che sono stati resi non proliferativi. Queste due popolazioni vengono quindi incubate insieme, generalmente per circa 5-6 giorni. Dopo l’incubazione iniziale, la bromodeossiuridina (BrdU) viene aggiunta a ciascuna miscela e viene incorporata nel DNA delle cellule proliferanti mentre vengono incubate per ulteriori 12-24 ore. Infine, il BrdU viene lavato dalla miscela e viene eseguito un saggio immunoassorbente legato all’enzima (ELISA) per quantificare la quantità di BrdU come misura per la proliferazione cellulare. Alla fine, si sta valutando la risposta di proliferazione delle cellule bersaglio che si verifica quando si mescolano le due popolazioni di linfociti.
MLR bidirezionale-
Un MLR bidirezionale differisce da un MLR unidirezionale in quanto entrambe le popolazioni cellulari sono in grado di proliferare. Poiché entrambe le popolazioni cellulari sono in grado di proliferare, il progetto sperimentale specifico deve tenerne conto. L’analisi per la quantità di proliferazione cellulare utilizza nuovamente l’incorporazione di BrdU nel DNA con un successivo ELISA BrdU-specifico.
In poche parole, gli MLR sono praticamente come suonano; mescolando popolazioni di linfociti insieme e misurando la reazione che si verifica. In una MLR unidirezionale, solo una popolazione di linfociti può rispondere o proliferare. In un MLR bidirezionale, entrambe le popolazioni possono proliferare. Ora che abbiamo stabilito cos’è una reazione linfocitaria mista, vediamo perché qualcuno dovrebbe eseguirne una!
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