in het kort, gemengde lymfocyten reacties (MLR ‘ s) zijn celproliferatie assays. Er zijn een paar belangrijke types van MLR ‘ s (een-weg, twee-weg, en drie-weg), en veel verschillende manieren om ze op te zetten, zodat ze voldoen aan de richtlijnen van een wetenschapper of organisatie, evenals de regelgevende richtlijnen die ze moeten volgen. In een poging om deze gids eenvoudig te houden, zullen we alleen de twee belangrijkste types van MLR ‘ s bespreken.
One-way MLR –
One-way MLR ‘ s zijn een celproliferatietest waarbij één populatie lymfocyten (respondercellen) wordt gestimuleerd om te prolifereren door een andere populatie lymfocyten (stimulatorcellen) die niet-proliferatief zijn geworden. Deze twee populaties worden dan samen geïncubeerd, over het algemeen voor ongeveer 5-6 dagen. Na de eerste incubatie, Bromodeoxyuridine (BrdU) wordt toegevoegd aan elk mengsel, en wordt opgenomen in het DNA van de prolifererende cellen terwijl ze worden geïncubeerd voor een extra 12-24 uur. Ten slotte wordt de BrdU uit het mengsel gewassen en wordt een Enzyme-linked Immunosorbant Assay (ELISA) uitgevoerd om de hoeveelheid BrdU te kwantificeren als maat voor celproliferatie. Uiteindelijk evalueert u de proliferatiereactie van de doelcellen die optreedt wanneer u de twee populaties lymfocyten mengt.
tweerichtings MLR –
een tweerichtings MLR verschilt van een one-way MLR doordat beide celpopulaties zich kunnen vermenigvuldigen. Aangezien beide celpopulaties zich kunnen verspreiden, moet het specifieke experimentele ontwerp hiermee rekening houden. De analyse voor de hoeveelheid celproliferatie gebruikt opnieuw brdu-opname in DNA met een volgende BrdU-specifieke ELISA.
in een notendop, MLR ‘ s zijn ongeveer wat ze klinken; het mengen van populaties lymfocyten samen, en het meten van de reactie die optreedt. In een enkele MLR-richting kan slechts één lymfocytenpopulatie reageren of zich vermenigvuldigen. In een tweerichtings MLR kunnen beide populaties zich vermenigvuldigen. Nu dat we hebben vastgesteld wat een gemengde lymfocyten reactie is, laten we eens kijken waarom iemand zou uitvoeren!
<Back Next>